链霉菌是最高等的放线菌。放线菌目的一科。许多种是抗生素的产生菌而且产生抗生素的种类最多而著名(如链霉素),代表种为白色链霉菌。开发链霉菌高效培养、检测和分选的高通量筛选技术具有重要意义。
近日,天津工业生物技术研究所开发了基于液滴微流控的链霉菌高通量筛选技术。基于液滴微流控的链霉菌高通量筛选平台可以用于菌体生长早期对于启动子等调控元件的筛选,也可以用于生长中期对于胞内、胞外目标蛋白的筛选,且在次级代谢产物如抗生素等筛选方面具有应用前景。
微流控是在微米尺度空间对流体进行操控的一种技术,该技术可以将化学、生物等实验室的基本功能微缩到一个几平方厘米芯片上。液滴微流控是微流控芯片技术的一种形式。液滴微流控作为微流控芯片研究中的重要分支,是近年来在传统连续流微流控系统基础上发展起来的,利用互不相溶的两液相产生分散的微液滴进行实验操作的非连续流微流控技术。
微流控中的微尺度液滴领域,相比于传统的连续流,离散化的乳液以其试剂消耗量极小为显著特征,可以极大的降低昂贵试剂消耗成本。每一个形态稳定的液滴均可视为独立的微反应器,减少了交叉污染,便于操控,其很大的比表面积还能加快各种反应速度和传热传速度,因此是药物合成,单细胞分析,分子生物学,材料合成等领域的理想选择。液滴微流控相比于其他微流控技术逐渐成为生化分析的热门手段。
应用领域非常广泛:液滴微反应器、药物输运和释放、单细胞包裹分析、基于液滴的数字化PCR、组织工程、诊断成像、他工程类应用。
高通量筛选技术是指以分子水平和细胞水平的实验方法为基础,以微板形式作为实验工具载体,以自动化操作系统执行试验过程,以灵敏快速的检测仪器采集实验结果数据,以计算机分析处理实验数据,在同一时间检测数以千万的样品,并以得到的相应数据库支持运转的技术体系,它具有微量、快速、灵敏和准确等特点。简言之就是可以通过一次实验获得大量的信息,并从中找到有价值的信息。
高通量筛选时每天要对数以千万的样品进行检测,工作枯燥,步骤单一,操作人员容易疲劳、出错。自动化操作系统由计算机及其操作软件、自动化加样设备、温孵离心设备和堆栈4个部分组成。自动化操作系统代替人工操作显然有诸多优势,它利用计算机通过操作软件控制整个实验过程,编程过程简洁明了。
随着对高通量药物筛选的重视程度不断提高,用于高通量药物筛选操作设备和检测仪器都有了长足发展,实现了计算机控制的自动化,减少了操作误差的发生,提高了筛选效率和结果的准确性。高通量筛选的特色效用高通量筛选技术是将多种技术方法有机结合而形成的一种新技术体系,它以微板形式作为实验工具载体,以自动化操作系统执行实验过程,以灵敏快速的检测仪器采集实验数据,以计算机对数以千计的样品数据进行分析处理,从而得出科学准确的实验结果和特色效用。
近年来,光学测定技术在美、英两国研究人员在高通量筛选检测中,努力进行了光学测定方法的研究,建立了大量的非同位素标记测定法,如用分光光度检测法筛选蛋白酪氨酸激酶抑制剂、组织纤溶酶原激活剂等,均获得成功。